1.項(xiàng)目背景
1.1臨床意義
摘自《25-羥基維生素D檢測(cè)試劑注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則》
維生素D是一種脂溶性類固醇衍生物，是人體必需的脂溶性維生素，經(jīng)紫外線照射后可轉(zhuǎn)化為維生素D2 。人體從食物攝入或在體內(nèi)合成的膽固醇經(jīng)轉(zhuǎn)變?yōu)?-脫氫膽固醇并貯存于皮下，經(jīng)紫外線照射后可轉(zhuǎn)化為維生素D3 。維生素D主要有維生素D3 （膽鈣化甾醇）和維生素D2 （麥角鈣化甾醇）兩種形式。其水平受很多因素的影響，主要包括紫外線輻射、膳食補(bǔ)充、年齡和肥胖、種族和民族因素等。維生素D本身不具有生物活性，需要發(fā)生2次羥基化轉(zhuǎn)化為生物活性形式。第1次羥基化發(fā)生在肝臟，產(chǎn)生25-羥基維生素D，第2次羥基化主要發(fā)生在腎臟，產(chǎn)生具有生物活性代謝物1,25-二羥維生素D。當(dāng)1,25-（OH）2 D足量時(shí)，它可進(jìn)一步在腎臟轉(zhuǎn)化為24,25-（OH）2 D，最后發(fā)生分解代謝。循環(huán)中的25-羥基維生素D的半衰期為2-3周。
因此，在醫(yī)學(xué)上，對(duì)血液中25-羥基維生素D的檢測(cè)經(jīng)常被用于確定體內(nèi)維生素D的含量，血液中25-羥基維生素D的濃度被認(rèn)為是體現(xiàn)人體維生素D狀態(tài)的較佳指標(biāo)。
1.2小分子雙抗體夾心法
2015年公開專利CN104969067A《維生素D的測(cè)定方法及測(cè)定用試劑盒》提及小分子夾心法，摘抄部分內(nèi)容如下。
使用抗體作為具有維生素D親和性的物質(zhì)的情況下，可以進(jìn)一步使用二抗。作為二抗，可以為維生素D的抗體（一抗）的一抗部分的抗體，也可以為維生素D及一抗的復(fù)合物的抗體。二抗等抗體可以與檢測(cè)用物質(zhì)連接。
2024年公開專利CN117871874A《小分子物質(zhì)免疫檢測(cè)方法》對(duì)小分子夾心法的反應(yīng)原理做了詳細(xì)闡述，摘抄部分內(nèi)容如下。
本發(fā)明提出了一種小分子物質(zhì)免疫檢測(cè)方法，其特征在于，包括：（1）將含有小分子物質(zhì)的樣本、配體、第二抗體和表面活性劑進(jìn)行反應(yīng)，得到小分子物質(zhì)-配體-第二抗體三元復(fù)合物，且所述小分子物質(zhì)-配體-第二抗體三元復(fù)合物中小分子物質(zhì)誘導(dǎo)配體形成至少一個(gè)新的構(gòu)象表位，所述第二抗體可特異性結(jié)合所述至少一個(gè)新的構(gòu)象表位，所述表面活性劑可消除所述第二抗體與構(gòu)象未改變的配體之間的結(jié)合；（2）檢測(cè)所述小分子物質(zhì)-配體-第二抗體三元復(fù)合物。
樣本中的小分子物質(zhì)與配體發(fā)生特異性結(jié)合，得到小分子物質(zhì)-配體復(fù)合物，并且小分子物質(zhì)-配體復(fù)合物中小分子物質(zhì)誘導(dǎo)配體形成至少一個(gè)新的構(gòu)象表位。小分子物質(zhì)-配體復(fù)合物與第二抗體和表面活性劑反應(yīng)，第二抗體特異性地與形成新構(gòu)象表位的配體結(jié)合，同時(shí)也會(huì)與構(gòu)象未改變的配體產(chǎn)生弱結(jié)合。表面活性劑可消除第二抗體與構(gòu)象未改變的配體之間的結(jié)合，得到小分子物質(zhì)-配體-第二抗體三元復(fù)合物。通過檢測(cè)三元復(fù)合物，可以實(shí)現(xiàn)小分子物質(zhì)檢測(cè)。由此，采用雙抗體夾心法可以提高檢測(cè)準(zhǔn)確性和靈敏度，不同濃度梯度樣本檢測(cè)區(qū)分度高。同時(shí)，減少了篩選高特異性復(fù)合物抗體的難度，更有利于小分子物質(zhì)檢測(cè)試劑盒的大規(guī)模生產(chǎn)和檢測(cè)，應(yīng)用價(jià)值高。
2. 性能表現(xiàn)
針對(duì)25-羥基維生素D抗原的檢測(cè)（夾心法），西寶生物推出2種抗體及3種解離劑。
25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531B）識(shí)別抗原抗體復(fù)合物；
25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531C）識(shí)別小分子抗原。
具體性能如下（以下評(píng)估僅代表在西寶生物的工藝體系下的驗(yàn)證，建議客戶根據(jù)自身工藝進(jìn)行更為詳細(xì)的驗(yàn)證）。
2.1化學(xué)發(fā)光（AE）平臺(tái)
組合1：25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531B）包被羧基磁珠+25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531C）標(biāo)記吖啶酯；
線性范圍：1.5ng/mL-150ng/mL；最低檢出限：1.5ng/mL。
2.2化學(xué)發(fā)光（AP）平臺(tái)
組合2：25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531B）包被羧基磁珠+25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531C）標(biāo)記堿性磷酸酶；
線性范圍：1.5ng/mL-150ng/mL；最低檢出限：1.5ng/mL。
2.3熒光免疫層析平臺(tái)
組合3：25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531C）標(biāo)記熒光微球+25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531B）劃膜；
線性范圍：5ng/mL-100ng/mL；最低檢出限：5ng/mL。
3.臨床相關(guān)性
3.1化學(xué)發(fā)光（AE）平臺(tái)：
3.1.1 西寶生物發(fā)光（AE）平臺(tái)25-羥基維生素D抗體配對(duì)組合1與質(zhì)譜法賦值的臨床樣本相關(guān)性R2>0.95，相關(guān)性良好；
3.1.2西寶生物發(fā)光（AE）平臺(tái)25-羥基維生素D抗體配對(duì)組合1與羅氏診斷的25-羥基維生素D試劑（電化學(xué)發(fā)光法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R2在0.90左右，相關(guān)性較好。
3.2化學(xué)發(fā)光（AP）平臺(tái)：
3.2.1西寶生物發(fā)光（AP）平臺(tái)25-羥基維生素D抗體配對(duì)組合2與質(zhì)譜法賦值的臨床樣本相關(guān)性R2在0.95左右，相關(guān)性良好；
3.2.2西寶生物發(fā)光（AP）平臺(tái)25-羥基維生素D抗體配對(duì)組合2與羅氏診斷的25-羥基維生素D試劑（電化學(xué)發(fā)光法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R2＞0.90，相關(guān)性較好。
3.3熒光免疫層析平臺(tái)：
西寶生物熒光免疫層析平臺(tái)25-羥基維生素D抗體配對(duì)組合3與羅氏診斷25-羥基維生素D試劑（電化學(xué)發(fā)光法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R2＞0.90，相關(guān)性較好。
4. 測(cè)試方案
4.1化學(xué)發(fā)光（AE）平臺(tái)-抗體配對(duì)組合1
樣本:樣品加樣量10ul；
試劑1：25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531B）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑2：25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531C）標(biāo)記-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑3：25-羥基維生素D解離液（發(fā)光專用1）（貨號(hào)：DCH0207B）/25-羥基維生素D解離液（發(fā)光專用2）（貨號(hào)：DCH0207A）
注釋：25-羥基維生素D解離液（發(fā)光專用1）（貨號(hào)：DCH0207B）對(duì)質(zhì)譜法賦值臨床樣本效果較好；
25-羥基維生素D解離液（發(fā)光專用2）（貨號(hào)：DCH0207A）對(duì)羅氏診斷（電化學(xué)發(fā)光法）賦值臨床樣本效果較好；
反應(yīng)條件：
第一步：10ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2+80ul試劑3混合，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入預(yù)激發(fā)液及激發(fā)液，進(jìn)行測(cè)試。
測(cè)試使用發(fā)光儀器:科斯邁SMART 500S。
4.2化學(xué)發(fā)光（AP）平臺(tái)-抗體配對(duì)組合2：
樣本:樣品加樣量10ul/20ul；
試劑1：25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531B）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑2：25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531C）標(biāo)記-堿性磷酸酶稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑3：25-羥基維生素D解離液（發(fā)光專用1）（貨號(hào)：DCH0207B）/25-羥基維生素D解離液（發(fā)光專用2）（貨號(hào)：DCH0207A）
注釋：25-羥基維生素D解離液（發(fā)光專用1）（貨號(hào)：DCH0207B）對(duì)質(zhì)譜法賦值臨床樣本效果較好；
25-羥基維生素D解離液（發(fā)光專用2）（貨號(hào)：DCH0207A）對(duì)羅氏診斷（電化學(xué)發(fā)光法）賦值臨床樣本效果較好；
反應(yīng)條件：
第一步：10ul/20ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2+80ul試劑3混合，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入底物，進(jìn)行測(cè)試。
測(cè)試使用發(fā)光儀器:迎凱Shine i2900。
4.3熒光免疫層析平臺(tái)抗體配對(duì)組合3：
樣本:加樣量10ul；
反應(yīng)條件：10ul樣品+100ul 25-羥基維生素D解離液（熒光層析專用）（貨號(hào)：DCH0207C）混勻（無需等待解離），上樣，反應(yīng)時(shí)間（10min-15min）；
測(cè)試使用熒光儀器:和邁FIC-S100。
5.產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 推薦配對(duì) |
25 羥基維生素 D（25-OH VD）抗體 | ECY4531B | 25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531B）包被羧基磁珠+25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531C）標(biāo)記吖啶酯（發(fā)光配對(duì)組合1） 25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531B）包被羧基磁珠+25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531C）標(biāo)記堿性磷酸酶（發(fā)光配對(duì)組合2） 25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531C）標(biāo)記熒光微球+25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531B）劃膜（熒光配對(duì)組合3） |
25 羥基維生素 D（25-OH VD）抗體 | ECY4531C | |
25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531B）包被羧基磁珠濃縮液 | DKY1333A | DKY1333A+ DKY1333B（AE化學(xué)發(fā)光） |
25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531C）吖啶酯濃縮液 | DKY1333B | |
25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531C）標(biāo)記堿性磷酸酶濃縮液 | DKY1333C | DKY1333A+ DKY1333C（AP化學(xué)發(fā)光） |
25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531C）標(biāo)記熒光微球濃縮液 | DKY1333D | DKY1333A+ DKY1333D（免疫熒光層析） |
AMPPD 發(fā)光底物液（即用型） | DCD0517A | |
AMPPD 發(fā)光底物液（即用型） | DCD0517B | |
羧基磁性微球，1.5um | DEG0800C | |
時(shí)間分辨熒光微球，羧基（200nm） | AEG0786B | |
25-羥基維生素D解離液（發(fā)光專用1） | DCH0207B | 適合化學(xué)發(fā)光（質(zhì)譜法賦值臨床樣本） |
25-羥基維生素D解離液（發(fā)光專用2） | DCH0207A | 適合化學(xué)發(fā)光（羅氏診斷電化學(xué)發(fā)光法樣本 ） |
25-羥基維生素D解離液（熒光層析專用） | DCH0207C | 適合免疫熒光層析平臺(tái) |
目前，由于維生素D檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)化工作剛剛起步，各種檢測(cè)方法間存在著明顯的結(jié)果差異，尤其是商業(yè)化方法以及不同實(shí)驗(yàn)室的自建方法。
1.液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）作為小分子檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)，雖然特異性好、準(zhǔn)確度高，但其通量小、前處理復(fù)雜、對(duì)設(shè)備和人員要求高，更重要的是出報(bào)告時(shí)間超過6小時(shí)，且無法當(dāng)天出報(bào)告，因此難以廣泛使用。
2.主流化學(xué)發(fā)光廠家檢測(cè)維生素D的主要方法還有競(jìng)爭(zhēng)法。
3.雙抗夾心法相較于競(jìng)爭(zhēng)法在靈敏度、特異性和檢測(cè)范圍均有明顯優(yōu)勢(shì)，使用小分子夾心法檢測(cè)維生素D近年得到了廠商和臨床端越來越多的認(rèn)可。
西寶生物作為體外診斷上游原料供應(yīng)商，除上述新開發(fā)的夾心法抗原抗體試劑原料，還能提供競(jìng)爭(zhēng)法相關(guān)試劑.詳情如下：
西寶物料 | 產(chǎn)品 | 類型 | 規(guī)格 | 建議使用 |
EDD0425A | 25 羥基維生素 D（25-OH-VD3-BSA）抗原 | 包被 | 1mg | CLIA、LF （競(jìng)爭(zhēng)法） |
ECY4531A | 25 羥基維生素 D（25-OH VD）抗體 | 標(biāo)記 | 1mg | |
DCH0207B | 25-羥基維生素D解離液（發(fā)光專用1） | 100ml | ||
DCH0207A | 25-羥基維生素D解離液（發(fā)光專用2） | 100ml | ||
DCH0207C | 25-羥基維生素D解離液（熒光層析專用） | 100ml |
1.項(xiàng)目背景
1.1臨床意義
摘自《25-羥基維生素D檢測(cè)試劑注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則》
維生素D是一種脂溶性類固醇衍生物，是人體必需的脂溶性維生素，經(jīng)紫外線照射后可轉(zhuǎn)化為維生素D2 。人體從食物攝入或在體內(nèi)合成的膽固醇經(jīng)轉(zhuǎn)變?yōu)?-脫氫膽固醇并貯存于皮下，經(jīng)紫外線照射后可轉(zhuǎn)化為維生素D3 。維生素D主要有維生素D3 （膽鈣化甾醇）和維生素D2 （麥角鈣化甾醇）兩種形式。其水平受很多因素的影響，主要包括紫外線輻射、膳食補(bǔ)充、年齡和肥胖、種族和民族因素等。維生素D本身不具有生物活性，需要發(fā)生2次羥基化轉(zhuǎn)化為生物活性形式。第1次羥基化發(fā)生在肝臟，產(chǎn)生25-羥基維生素D，第2次羥基化主要發(fā)生在腎臟，產(chǎn)生具有生物活性代謝物1,25-二羥維生素D。當(dāng)1,25-（OH）2 D足量時(shí)，它可進(jìn)一步在腎臟轉(zhuǎn)化為24,25-（OH）2 D，最后發(fā)生分解代謝。循環(huán)中的25-羥基維生素D的半衰期為2-3周。
因此，在醫(yī)學(xué)上，對(duì)血液中25-羥基維生素D的檢測(cè)經(jīng)常被用于確定體內(nèi)維生素D的含量，血液中25-羥基維生素D的濃度被認(rèn)為是體現(xiàn)人體維生素D狀態(tài)的較佳指標(biāo)。
1.2小分子雙抗體夾心法
2015年公開專利CN104969067A《維生素D的測(cè)定方法及測(cè)定用試劑盒》提及小分子夾心法，摘抄部分內(nèi)容如下。
使用抗體作為具有維生素D親和性的物質(zhì)的情況下，可以進(jìn)一步使用二抗。作為二抗，可以為維生素D的抗體（一抗）的一抗部分的抗體，也可以為維生素D及一抗的復(fù)合物的抗體。二抗等抗體可以與檢測(cè)用物質(zhì)連接。
2024年公開專利CN117871874A《小分子物質(zhì)免疫檢測(cè)方法》對(duì)小分子夾心法的反應(yīng)原理做了詳細(xì)闡述，摘抄部分內(nèi)容如下。
本發(fā)明提出了一種小分子物質(zhì)免疫檢測(cè)方法，其特征在于，包括：（1）將含有小分子物質(zhì)的樣本、配體、第二抗體和表面活性劑進(jìn)行反應(yīng)，得到小分子物質(zhì)-配體-第二抗體三元復(fù)合物，且所述小分子物質(zhì)-配體-第二抗體三元復(fù)合物中小分子物質(zhì)誘導(dǎo)配體形成至少一個(gè)新的構(gòu)象表位，所述第二抗體可特異性結(jié)合所述至少一個(gè)新的構(gòu)象表位，所述表面活性劑可消除所述第二抗體與構(gòu)象未改變的配體之間的結(jié)合；（2）檢測(cè)所述小分子物質(zhì)-配體-第二抗體三元復(fù)合物。
樣本中的小分子物質(zhì)與配體發(fā)生特異性結(jié)合，得到小分子物質(zhì)-配體復(fù)合物，并且小分子物質(zhì)-配體復(fù)合物中小分子物質(zhì)誘導(dǎo)配體形成至少一個(gè)新的構(gòu)象表位。小分子物質(zhì)-配體復(fù)合物與第二抗體和表面活性劑反應(yīng)，第二抗體特異性地與形成新構(gòu)象表位的配體結(jié)合，同時(shí)也會(huì)與構(gòu)象未改變的配體產(chǎn)生弱結(jié)合。表面活性劑可消除第二抗體與構(gòu)象未改變的配體之間的結(jié)合，得到小分子物質(zhì)-配體-第二抗體三元復(fù)合物。通過檢測(cè)三元復(fù)合物，可以實(shí)現(xiàn)小分子物質(zhì)檢測(cè)。由此，采用雙抗體夾心法可以提高檢測(cè)準(zhǔn)確性和靈敏度，不同濃度梯度樣本檢測(cè)區(qū)分度高。同時(shí)，減少了篩選高特異性復(fù)合物抗體的難度，更有利于小分子物質(zhì)檢測(cè)試劑盒的大規(guī)模生產(chǎn)和檢測(cè)，應(yīng)用價(jià)值高。
2. 性能表現(xiàn)
針對(duì)25-羥基維生素D抗原的檢測(cè)（夾心法），西寶生物推出2種抗體及3種解離劑。
25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531B）識(shí)別抗原抗體復(fù)合物；
25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531C）識(shí)別小分子抗原。
具體性能如下（以下評(píng)估僅代表在西寶生物的工藝體系下的驗(yàn)證，建議客戶根據(jù)自身工藝進(jìn)行更為詳細(xì)的驗(yàn)證）。
2.1化學(xué)發(fā)光（AE）平臺(tái)
組合1：25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531B）包被羧基磁珠+25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531C）標(biāo)記吖啶酯；
線性范圍：1.5ng/mL-150ng/mL；最低檢出限：1.5ng/mL。
2.2化學(xué)發(fā)光（AP）平臺(tái)
組合2：25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531B）包被羧基磁珠+25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531C）標(biāo)記堿性磷酸酶；
線性范圍：1.5ng/mL-150ng/mL；最低檢出限：1.5ng/mL。
2.3熒光免疫層析平臺(tái)
組合3：25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531C）標(biāo)記熒光微球+25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531B）劃膜；
線性范圍：5ng/mL-100ng/mL；最低檢出限：5ng/mL。
3.臨床相關(guān)性
3.1化學(xué)發(fā)光（AE）平臺(tái)：
3.1.1 西寶生物發(fā)光（AE）平臺(tái)25-羥基維生素D抗體配對(duì)組合1與質(zhì)譜法賦值的臨床樣本相關(guān)性R2>0.95，相關(guān)性良好；
3.1.2西寶生物發(fā)光（AE）平臺(tái)25-羥基維生素D抗體配對(duì)組合1與羅氏診斷的25-羥基維生素D試劑（電化學(xué)發(fā)光法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R2在0.90左右，相關(guān)性較好。
3.2化學(xué)發(fā)光（AP）平臺(tái)：
3.2.1西寶生物發(fā)光（AP）平臺(tái)25-羥基維生素D抗體配對(duì)組合2與質(zhì)譜法賦值的臨床樣本相關(guān)性R2在0.95左右，相關(guān)性良好；
3.2.2西寶生物發(fā)光（AP）平臺(tái)25-羥基維生素D抗體配對(duì)組合2與羅氏診斷的25-羥基維生素D試劑（電化學(xué)發(fā)光法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R2＞0.90，相關(guān)性較好。
3.3熒光免疫層析平臺(tái)：
西寶生物熒光免疫層析平臺(tái)25-羥基維生素D抗體配對(duì)組合3與羅氏診斷25-羥基維生素D試劑（電化學(xué)發(fā)光法）賦值的臨床樣本相關(guān)性R2＞0.90，相關(guān)性較好。
4. 測(cè)試方案
4.1化學(xué)發(fā)光（AE）平臺(tái)-抗體配對(duì)組合1
樣本:樣品加樣量10ul；
試劑1：25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531B）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑2：25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531C）標(biāo)記-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑3：25-羥基維生素D解離液（發(fā)光專用1）（貨號(hào)：DCH0207B）/25-羥基維生素D解離液（發(fā)光專用2）（貨號(hào)：DCH0207A）
注釋：25-羥基維生素D解離液（發(fā)光專用1）（貨號(hào)：DCH0207B）對(duì)質(zhì)譜法賦值臨床樣本效果較好；
25-羥基維生素D解離液（發(fā)光專用2）（貨號(hào)：DCH0207A）對(duì)羅氏診斷（電化學(xué)發(fā)光法）賦值臨床樣本效果較好；
反應(yīng)條件：
第一步：10ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2+80ul試劑3混合，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入預(yù)激發(fā)液及激發(fā)液，進(jìn)行測(cè)試。
測(cè)試使用發(fā)光儀器:科斯邁SMART 500S。
4.2化學(xué)發(fā)光（AP）平臺(tái)-抗體配對(duì)組合2：
樣本:樣品加樣量10ul/20ul；
試劑1：25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531B）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑2：25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531C）標(biāo)記-堿性磷酸酶稀釋物，用量50ul/測(cè)試；
試劑3：25-羥基維生素D解離液（發(fā)光專用1）（貨號(hào)：DCH0207B）/25-羥基維生素D解離液（發(fā)光專用2）（貨號(hào)：DCH0207A）
注釋：25-羥基維生素D解離液（發(fā)光專用1）（貨號(hào)：DCH0207B）對(duì)質(zhì)譜法賦值臨床樣本效果較好；
25-羥基維生素D解離液（發(fā)光專用2）（貨號(hào)：DCH0207A）對(duì)羅氏診斷（電化學(xué)發(fā)光法）賦值臨床樣本效果較好；
反應(yīng)條件：
第一步：10ul/20ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2+80ul試劑3混合，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入底物，進(jìn)行測(cè)試。
測(cè)試使用發(fā)光儀器:迎凱Shine i2900。
4.3熒光免疫層析平臺(tái)抗體配對(duì)組合3：
樣本:加樣量10ul；
反應(yīng)條件：10ul樣品+100ul 25-羥基維生素D解離液（熒光層析專用）（貨號(hào)：DCH0207C）混勻（無需等待解離），上樣，反應(yīng)時(shí)間（10min-15min）；
測(cè)試使用熒光儀器:和邁FIC-S100。
5.產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 推薦配對(duì) |
25 羥基維生素 D（25-OH VD）抗體 | ECY4531B | 25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531B）包被羧基磁珠+25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531C）標(biāo)記吖啶酯（發(fā)光配對(duì)組合1） 25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531B）包被羧基磁珠+25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531C）標(biāo)記堿性磷酸酶（發(fā)光配對(duì)組合2） 25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531C）標(biāo)記熒光微球+25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531B）劃膜（熒光配對(duì)組合3） |
25 羥基維生素 D（25-OH VD）抗體 | ECY4531C | |
25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531B）包被羧基磁珠濃縮液 | DKY1333A | DKY1333A+ DKY1333B（AE化學(xué)發(fā)光） |
25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531C）吖啶酯濃縮液 | DKY1333B | |
25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531C）標(biāo)記堿性磷酸酶濃縮液 | DKY1333C | DKY1333A+ DKY1333C（AP化學(xué)發(fā)光） |
25-羥基維生素D抗體（貨號(hào)：ECY4531C）標(biāo)記熒光微球濃縮液 | DKY1333D | DKY1333A+ DKY1333D（免疫熒光層析） |
AMPPD 發(fā)光底物液（即用型） | DCD0517A | |
AMPPD 發(fā)光底物液（即用型） | DCD0517B | |
羧基磁性微球，1.5um | DEG0800C | |
時(shí)間分辨熒光微球，羧基（200nm） | AEG0786B | |
25-羥基維生素D解離液（發(fā)光專用1） | DCH0207B | 適合化學(xué)發(fā)光（質(zhì)譜法賦值臨床樣本） |
25-羥基維生素D解離液（發(fā)光專用2） | DCH0207A | 適合化學(xué)發(fā)光（羅氏診斷電化學(xué)發(fā)光法樣本 ） |
25-羥基維生素D解離液（熒光層析專用） | DCH0207C | 適合免疫熒光層析平臺(tái) |
目前，由于維生素D檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)化工作剛剛起步，各種檢測(cè)方法間存在著明顯的結(jié)果差異，尤其是商業(yè)化方法以及不同實(shí)驗(yàn)室的自建方法。
1.液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）作為小分子檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)，雖然特異性好、準(zhǔn)確度高，但其通量小、前處理復(fù)雜、對(duì)設(shè)備和人員要求高，更重要的是出報(bào)告時(shí)間超過6小時(shí)，且無法當(dāng)天出報(bào)告，因此難以廣泛使用。
2.主流化學(xué)發(fā)光廠家檢測(cè)維生素D的主要方法還有競(jìng)爭(zhēng)法。
3.雙抗夾心法相較于競(jìng)爭(zhēng)法在靈敏度、特異性和檢測(cè)范圍均有明顯優(yōu)勢(shì)，使用小分子夾心法檢測(cè)維生素D近年得到了廠商和臨床端越來越多的認(rèn)可。
西寶生物作為體外診斷上游原料供應(yīng)商，除上述新開發(fā)的夾心法抗原抗體試劑原料，還能提供競(jìng)爭(zhēng)法相關(guān)試劑.詳情如下：
西寶物料 | 產(chǎn)品 | 類型 | 規(guī)格 | 建議使用 |
EDD0425A | 25 羥基維生素 D（25-OH-VD3-BSA）抗原 | 包被 | 1mg | CLIA、LF （競(jìng)爭(zhēng)法） |
ECY4531A | 25 羥基維生素 D（25-OH VD）抗體 | 標(biāo)記 | 1mg | |
DCH0207B | 25-羥基維生素D解離液（發(fā)光專用1） | 100ml | ||
DCH0207A | 25-羥基維生素D解離液（發(fā)光專用2） | 100ml | ||
DCH0207C | 25-羥基維生素D解離液（熒光層析專用） | 100ml |
