【產(chǎn)品基本信息】

重組型TEV蛋白酶（rTEV Protease）是經(jīng)過基因工程改造在大腸桿菌中重組表達帶His標(biāo)簽(6X His tag)和純化后的重組蛋白酶，不僅保持天然TEV酶的功能活性，且在廣譜的溫度范圍內(nèi)表現(xiàn)出更強的穩(wěn)定性和特異性。rTEV Protease是一種用來切除融合蛋白上親和標(biāo)簽的常用工具酶，具有很強的位點特異性。酶活性單位定義：

在1X rTEV Buffer（50mM Tris-HCl，pH8.0，0.1mM EDTA，1mM DTT）中，30℃條件下反應(yīng)1小時，能夠切割>85%的3μg底物所需要的酶量定義為一個活性單位。

【產(chǎn)品特點】

嚴(yán)格識別七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S)，切割位點在谷氨酰胺和甘氨酸/絲氨酸之間。普遍應(yīng)用的七氨基酸序列為：Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEV Protease在pH 7.0，30℃時可達到最佳活性，但在pH 6.0-8.5和溫度4-30℃的廣泛范圍內(nèi)皆有活性，使得反應(yīng)條件的選擇可根據(jù)目的蛋白的情況而靈活變動。另外rTEV Protease切割后也能利用其N端的6×His標(biāo)簽，通過Ni-NTA樹脂去除，以達到純化目的蛋白的目的。

【應(yīng)用】

用于切除融合蛋白上親和標(biāo)簽。

【使用說明】

1.在1X rTEV Buffer（25mM Tris-HCl，150mM NaCl，pH8.0，0.1mM DTT）中，加入30μg融合蛋白和10μL rTEV Protease；

2.在30°C恒溫反應(yīng)一小時后，取50μL上述反應(yīng)液，置于單獨的EP管中；

3.向上述EP管中加入12.5μL 5×SDS Loading Buffer，樣品煮沸5min，取10μL進行SDS-PAGE電泳分析，確定調(diào)整所需的合適酶量和反應(yīng)時間。如果目的蛋白在30℃不穩(wěn)定，可以考慮4℃反應(yīng)過夜(16小時左右)。

【產(chǎn)品組分】

形式：液體25mM Tris-HCl,150mM NaCl,1mM EDTA,5mM DTT, 50%(v/v)Glycerol, pH8.0。